前胃泌素在人胃癌BGC-823细胞的悬浮肿瘤球中的表达

牛 茜，杨爱军，王晨昱，刘伟，李 敏

（730000兰州，兰州大学基础医学院病理学研究所，甘肃省新药临床前研究重点实验室）

[摘要] 目的 研究人胃癌BGC-823肿瘤细胞系中是否存在悬浮生长的肿瘤球，检测前胃泌素(progastrin，Pro-GRP)在肿瘤球中的表达。方法 取贴壁生长的BGC-823细胞，用有限稀释法和无血清培养法培养，并利用软琼脂克隆形成实验证实BGC-823中存在悬浮生长的具有干细胞特性的肿瘤球，流式细胞仪（FCM）检测该肿瘤球中ABCG2、CD44、CD166的表达。ELISA、细胞免疫荧光、FCM方法比较血清Pro-GRP分别在肿瘤球和贴壁细胞中的表达差异。结果 有限稀释法和无血清培养法均在BGC-823细胞系中培养出了悬浮生长的肿瘤球；克隆形成能力显示：肿瘤球为（37.63±5.99），贴壁细胞为（10.75±3.37），二者间有统计学差异（P=0.007） ...

[材料与方法] 人胃癌细胞系BGC-823为本实验室保存。DMEM/F12细胞培养液（Gbico公司），胎牛血清(杭州四季青公司)、B27、表皮生长因子( epidermal growth factor，EGF)、碱性成纤维细胞生长因子( basic fibroblast growth factor, bFGF) ( Gibico[写错了，多写了 一个字母i]公司)、胰岛素( 江苏万邦公司)、100U/ml青霉素、80 mg/ml链霉素、L-谷氨酰胺(Sigma)，胰蛋白酶(武汉博士德公司)。ABCG2[第一次出现请注明中英文全称]兔抗人mAb，Pro-GRP兔抗人mAb（上海蓝基生物科技有限公司），FITC标记山羊抗兔，DAPI/PI（武汉博士德公司），Pro-GRP-ELISA试剂盒（上海江莱生物科技有限公司[1]），FACS Aria 型流式细胞仪(BD公司)，倒置相差荧光显微镜（尼康公司）。
 

[备注] [1]“江莱生物”10年以来一直致力于免疫学技术的积累与沉淀，目前江莱生物实验室占地约3000平米，技术研发团队50余人，配备了全球最先进的分析和检测设备，我们通过自主创新以及与国内外的科研单位合作研发，不断突破新技术，目前我们研发了上千种指标，质量成熟，并长期出口到欧美市场，赢得了众多科研机构的认可 ...

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