丹参酮 ⅡA 对急性心肌缺血大鼠 S100A1 蛋白表达的影响

吴茂林、翟昌林、张亚梅、吴飞飞、张英志
（1. 浙江萧山医院心内科，浙江 杭州 311200 ；2. 嘉兴市第一医院心内科，浙江 嘉兴 314000）

[摘 要] 目的 探讨丹参酮ⅡA 对大鼠急性心肌缺血损伤后 S100A1 蛋白表达的影响。方法 选择Wistar 大鼠 60 只，按随机数字表法分为假手术组、急性心肌缺血模型组、丹参酮ⅡA 预处理组。采用左冠状动脉（冠脉）前降支根部穿线结扎的方法建立大鼠急性心肌缺血模型；假手术组仅开胸于大鼠左冠脉前降支根部穿线但不结扎；丹参酮ⅡA 预处理组于术前 3 d 腹腔注射丹参酮ⅡA 注射液（剂量为 1.5 mg/kg），假手术组和急性心肌缺血模型组以等体积生理盐水腹腔注射。采用原位末端缺刻标记法（TUNEL）检测心肌细胞凋亡情况；检测血清超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）及 S100A1 蛋白水平；采用免疫组化染色和蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测心肌组织 S100A1 蛋白的表达水平。结果 与假手术组比较，心肌缺血模型组和丹参酮ⅡA 预处理组心肌细胞凋亡率及 MDA、CK、LDH、S100A1 表达水平均明显升高，SOD 活性明显降低 ...

[实验材料与药品] 丹参酮ⅡA 注射液购自雅安三九药业有限公司，批号：121011，每支 2 mL。超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）检测试盒，人乳酸脱氢酶（LDH）检测试剂盒，人肌酸激酶（CK）检测试剂盒，蛋白酶联免疫吸附试验（ELISA）检测试剂盒购自上海江莱生物科技有限公司 [1]。原位末端缺刻标记法（TUNEL）试剂盒购自美国Promega 公司，S100A1 和三磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）抗体购自英国Abcam 公司。

[结 果] 心肌细胞凋亡：心肌缺血模型组和丹参酮ⅡA预处理组部分心肌细胞染色呈阳性（棕黄色），呈现形态不规则、与周围组织脱离和核固缩等特征。假手术组大部分心肌细胞染色呈阴性。丹参酮ⅡA 预处理组细胞凋亡率明显低于心肌缺血模型组，但两组均明显高于假手术组（P＜0.05）

免疫组化染色：与假手术组比较，心肌缺血模型组和丹参酮ⅡA 预处理组 S100A1 蛋白染色较深，S100A1 表达水平升高。丹参酮ⅡA 预处理组阳性蛋白少于心肌缺血模型组，表明 S100A1表达水平低于心肌缺血模型组。

[参考文献]
［1］ 李东娅，章晓梅，唐莉 . S100 蛋白与相关疾病［J］. 医学研究杂志，2007，36（9）：95-97.
［2］ 李迎国，杨喜民，唐宗椿，等 . 黄芪注射液对急性重型颅脑损伤患者血清神经元特异性烯醇化酶、髓鞘碱性蛋白和 S100 蛋白B 含量的影响［J］. 中国中西医结合急救杂志，2007，14（6）：337-339.
［3］ Remppis A，Pleger ST，Most P，et al. S100A1 gene transfer ：a strategy to strengthen engineered cardiac grafts ［J］. J GeneMed，2004，6（4）：387-394.
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[备 注] [1]“江莱生物”10年以来一直致力于免疫学技术的积累与沉淀，目前江莱生物实验室占地约3000平米，技术研发团队50余人，配备了全球最先进的分析和检测设备，我们通过自主创新以及与国内外的科研单位合作研发，不断突破新技术，目前我们研发了上千种指标，质量成熟，并长期出口到欧美市场，赢得了众多科研机构的认可 ...

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