Step1:打开软件ELISACalc,界面如下:
(点击下载软件 ELISACalc.zip)
Step2:输入数据:
① 标准品有S1 , S2 , S3 , S4 , S5 , S6 , S7 ,7个浓度。(0孔也就是Blank值不用输入)
②“X”代表浓度/剂量,“Y”代表OD/反应值。在运行软件的X、Y列中,依次输入相对应的值,如下图所示:
Step3:回归/拟合 模型(M),下拉选择二次曲线回归,X数据列下拉选择对数(10为底),Y数据列下拉选择对数(10为底),如下图所示:
Step4:点击“回归/拟合”,显示标曲。
Step5:点击“回归方程”,可以得到二次曲线回归方程以及r2值等。(同一个试剂盒可以用多种方式进行拟合,例如:四参数、直线。最终根据r2值大小判断曲线的拟合程度,越接近1,拟合程度越好。)
Step6:标准曲线已知,并且“X”浓度/剂量 和“Y”OD/反应值是已知的。根据标准曲线求浓度,也就是“由Y计算X”,来计算样本浓度。在空格中输入样品的OD值,回车或点击“计算",即能计算对应的浓度。(点击“复制”按钮可以将结果全部复制下来,粘贴到EXCEL表格中进行下一步做图分析。)