Step1：打开软件ELISACalc，界面如下：
（点击下载软件 ELISACalc.zip）

Step2：输入数据：

① 标准品有S1 , S2 , S3 , S4 , S5 , S6 , S7 ,7个浓度。（0孔也就是Blank值不用输入）

②“X”代表浓度/剂量，“Y”代表OD/反应值。在运行软件的X、Y列中，依次输入相对应的值，如下图所示：

Step3：回归/拟合 模型（M），下拉选择二次曲线回归，X数据列下拉选择对数（10为底），Y数据列下拉选择对数（10为底），如下图所示：

Step4：点击“回归/拟合”，显示标曲。

Step5：点击“回归方程”，可以得到二次曲线回归方程以及r2值等。（同一个试剂盒可以用多种方式进行拟合，例如：四参数、直线。最终根据r2值大小判断曲线的拟合程度，越接近1，拟合程度越好。）

Step6：标准曲线已知，并且“X”浓度/剂量 和“Y”OD/反应值是已知的。根据标准曲线求浓度，也就是“由Y计算X”，来计算样本浓度。在空格中输入样品的OD值，回车或点击“计算"，即能计算对应的浓度。（点击“复制”按钮可以将结果全部复制下来，粘贴到EXCEL表格中进行下一步做图分析。）