原理
葡萄糖在热醋酸溶液中与邻甲苯胺缩合生成蓝色西夫氏碱（schiff base），颜色的深浅与葡萄糖含量成正比。
试剂
1、饱和硼酸溶液
硼酸（H3BO3）6克，加蒸馏水100毫升，摇匀，放置过夜，取上清液应用。
2、饱和苯甲酸溶液
苯甲酸（C6H6COOH）250毫克，加蒸馏水100毫升，微热使溶解，冷后应用。
3、单一试剂
冰醋酸 920毫升
硫脲 1.5克
邻甲苯胺 80毫升
饱和硼酸 42毫升
充分混匀，置于棕色瓶内密闭，室温保存，至少可稳定二个月。
4、葡萄糖标准储存液56mmol/L （10mg/mL）
取无水纯葡萄糖（AR）数克，置于洁净烧杯内，于40-50℃烘干，置干燥器中至恒重。准确称取此葡萄糖1.00克，以饱和苯甲酸溶液溶解并转移入100毫升容量瓶内，再以饱和苯甲酸溶液稀释至100毫升刻度处，置冰箱长期保存。
5、葡萄糖标准应用液5.6mmol/L（1mg/mL）
将葡萄糖标准储存液用饱和苯甲酸溶液稀释10倍即成。存室温一个月稳定。
操作
血清葡萄糖测定操作步骤
| 加入样本及试剂 |
测定管 |
标准管 |
空白管 |
| 血清 |
0.1 |
— |
— |
| 标准溶液（5.6mmol/L） |
— |
0.1 |
— |
| 蒸馏水 |
— |
— |
0.1 |
| 单一试剂 |
5.0 |
5.0 |
5.0 |
| 混合后于沸水中准确煮沸8分钟，取出后移至冷水中冷却，用640nm或红色滤光板比色，以空白管校正吸光度至0点，分别读取各管吸光度。 |
注意事项
1、邻甲苯胺的处理：邻甲苯胺若显红棕色，则应重蒸馏，最好用全玻璃蒸馏器，切勿用橡皮塞（管）否则蒸馏时会使橡皮融熔。收集199-201℃馏出液，馏出液带微黄色，蒸馏时去首尾部分。向蒸馏所得的邻甲苯胺中按每500毫升加入0.5克盐酸氢铵，置56℃水浴中加热，不断振摇，密塞避光储冰箱备用。
2、煮沸时水面一定要盖过管内液面，否则温度不匀，影响显色。
3、此法受煮沸时间、比色时间等因素的影响。一般不宜以标准曲线法进行计算，故每次应同时做标准管。
4、高脂血标本最后显色的液体有时出现浑浊，影响结果。
5、邻甲苯胺的浓度如增高，则吸光度也增高，故配制时浓度应保持一致。
6、邻甲苯胺有毒，不可吸入其蒸汽，并不可沾染皮肤。平时应作为有毒试剂、避光，妥善储存。
7、试剂酸度很大，严防对人身和仪器的损害。
8、标本应及时处理，以免糖分解影响结果。
