目的:探讨激活素A对小鼠腹腔巨噬细胞活性的调节作用及其机制.方法:免疫组化观察
激活素A(ACV-A)在巨噬细胞上的表达,ELISA法检测小鼠腹腔巨噬细胞培养上清中
ACV-A分泌水平,采用RT-PCR检测小鼠腹腔巨噬细胞ACV-A mRNA、ActRⅡA mRNA及激活素受体相互作用蛋白2(ActRIP2) mRNA的表达.结果:激活素A可以促进原代培养小鼠腹腔巨噬细胞分泌ACV-A及ACV-A mRNA表达,并呈剂量依赖关系;激活素A对LPS活化的小鼠原代培养腹腔巨噬细胞分泌ACV-A及ACV-A mRNA的表达具有抑制作用,并呈剂量依赖关系.免疫组化染色证实ActRⅡA在巨噬细胞中高表达,激活素A对巨噬细胞表达ActRⅡA mRNA具有促进作用,采用抗ActRⅡA抗体可以阻断激活素A促进ACV-A mRNA表达作用,进一步检测表明激活素作用后ActRIP2 mRNA表达亦增加.结论:激活素与LPS比较可能是IL-1分泌的弱激动剂,激活素单独应用显示刺激IL-1分泌作用,而与LPS共同作用,则呈现抑制LPS强刺激作用;激活素可能通过ActRIIA-ActRIP2受体信号传导途径,调控巨噬细胞ACV-A分泌与合成.
关键词:
ELISA法,检测,激活素A(ACV-A)