黄芪对肺腺癌细胞生长抑制的实验研究
耿国军， 姜杰，杜好信，钱文轩，张义，杨丽华，陈端扬，陈隽鹏
（1 福建省厦门市中医院 厦门 361000；2 厦门大学医学院 福建厦门 361009）

【摘要】
目的：研究分化诱导剂黄芪(Astragalus)在体外对人肺腺癌 SPC-A-1 细胞生长抑制的影响。 方法：用不同浓度的黄芪分别处理肺腺癌 SPC-A-1 细胞后，镜下观察癌细胞的生长情况；测定软琼脂克隆形成率；MTT(噻唑蓝)法测定生长抑制率。 结果：不同浓度黄芪处理后细胞的生长明显受到抑制，细胞生长抑制率随黄芪的浓度增加而增加。 结论：黄芪对肺腺癌 SPC-A-1 细胞的生长有明显的抑制作用。

【材料与方法】
黄芪购自浙江杭州，配制为 20 g/L 的无菌溶液备用。流式细胞仪，为美国产品。SPC-A-1 细胞株为厦门大学生命科学学院提供。小牛血清购自上海江莱生物科技有限公司 [1]，实验时选用对数生长期细胞。

MTT 法 检测细胞生长抑制率。参照司徒镇强方法，调整细胞浓度至 103~104/mL，并使细胞分散良好；将稀释的细胞悬液加到 96 孔培养板内，每孔 200 μL。4~5 h 细胞贴壁后，加入不同浓度的黄芪，使不同组的终浓度分别为 0.25、0.50、0.75、1.00 mg/mL，对照组加等量的培养基，微型震荡器震荡后，用酶标仪于波长 492 nm 处测吸光度值(OD)，计算抑制率。

【结果】
不同浓度的黄芪对 SPC-A-1 细胞生长的影响
黄芪对 SPC-A-1 细胞 24 h 显示出生长抑制作用，48h 和 72 h 抑制作用 较 明 显。0.25、0.50、0.75、1.00mg/mL 黄芪对 SPC-A-1 均可抑制细胞增殖，且随浓度增加对 SPC-A-1 的抑制率也增加，不同浓度组间有统计学意义；而且同一浓度黄芪对 SPC-A-1 的抑制率随时间延长而增加，不同时间组间有统计学意义。

不同浓度的黄芪对 SPC-A-1 细胞软琼脂克隆形成能力的影响
随黄芪浓度增加，其克隆形成率逐渐下降，克隆抑制率逐渐上升，增殖抑制更加明显。

不同浓度的黄芪对 SPC-A-1 细胞作用 24 h 后吸光度值
吸光度值逐渐下降，其生长抑制率逐渐增加。

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【参考文献】
[1]许杜娟,吴强,杨雁,等.黄芪总苷的抑瘤作用及其作用机制[J].中国药理学通报,2003,19(7):823-826
[2]鄂征.组织培养与分子细胞学技术[M].北京：北京出版社,1996.312
[3]司徒镇强.细胞培养[M].西安：兴国图书出版公司,2001.186
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