可能原因 | 解决方法 |
洗板不充分 | 将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保洗涤充分 |
确保在洗涤前弃掉了所有残留抗体溶液 | |
样品或标准品中含干扰物 | 设置空白对照 |
缓冲液受污染 | 重新配制缓冲液 |
可能原因 | 解决方法 |
试剂添加顺序错误或试剂配制有误 | 重复实验 |
检查试剂配制方法 | |
复核试验试剂添加流程 | |
HRP被叠氮化合物污染 | 使用新鲜配制的试剂 |
抗体用量不足 | 使用推荐的抗体量 |
可能原因 | 解决方法 |
洗板不充分或跳过洗板步骤未去除残留的非结合过氧化物酶 | 严格按照说明书洗涤流程操作 |
封板胶纸或试剂储液槽重复使用导致HRP残留污染 | 每步均需使用新的封板膜或试剂储液槽 |
缓冲液有金属或HRP污染 | 配制新鲜缓冲液 |
可能原因 | 解决方法 |
实验操作流程有误 | 严格按照说明书操作流程 |
标准曲线稀释计算错误 | 重新计算制作新的标准曲线 |
可能原因 | 解决方法 |
洗板不充分 | 将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保洗涤充分 |
重复使用封板胶纸 | 每步均需更换使用新的封板胶纸 |
未使用封板胶纸 | 需使用封板胶纸 |
可能原因 | 解决方法 |
洗板不充分 | 将洗涤缓冲液加入孔中洗涤,确保洗涤充分 |
确保已在洗涤前弃掉所有残留溶液 | |
孵育温度发生变化 | 严格按照推荐的温度孵育 |
勿在环境温度变化大的地方孵育 | |
操作流程改变 | 严格按照相同的操作流程 |
封板胶纸重复使用导致HRP残留污染 | 每一步均使用新的封板胶纸 |
可能原因 | 解决方法 |
样品中无检测物或表达量极低 | 设置阳性对照 |
重复实验 |
可能原因 | 解决方法 |
酶标仪波长设置不正确 | 检查酶标仪参数设置 |
包被的酶标板超过使用效期 | 更换新批次试剂盒 |
可能原因 | 解决方法 |
孵育温度不均衡 | 孵育时使用封板胶纸 |
勿在环境温度变化大的地方孵育 |
可能原因 | 解决方法 |
酶标板未处于正确温度下 | 确保使用前酶标板和试剂处于室温下 |
溶液污染 | 避免使用含NaN3的试剂 |